咨询热线

18156995113

当前位置:首页   >  产品中心  >  Abnbio感受态细胞  >  发根(热激)感受态  >  MSU440Chemically发根(热激)感受态细胞

Chemically发根(热激)感受态细胞

简要描述:MSU440 Chemically Competent Cell/Chemically发根(热激)感受态细胞
保存条件:-80℃

  • 产品型号:MSU440
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-03-25
  • 访  问  量:100

详细介绍

品牌Abnbio货号ABN402-100
规格100支100ul供货周期现货
主要用途细胞培养应用领域化工,生物产业,制药

MSU440 Chemically Competent Cell  发根(热激)感受态细胞

基因型:

Agrobacterium rhizogenes(strR ) MSU440 Ri (agropine type)

简要说明:

发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。 MSU440发根农杆菌菌株含有农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(玉米,烟草,茶树,青蒿等),同时具有lian霉素抗性。MSU440化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(ka那霉素抗性)检测,转化效率>104 cfu/μg DNA

操作说明:

一:取-80℃保存的Ar A4发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。

二:每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈bo打管底混匀或用枪吹吸混匀,依         次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。

三:冰浴中拿出放室温,加入700μl 无抗生素的TY 液体培养基,于 28℃振荡培养 2小时。

四:6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上,倒置放于 28℃培养箱培养 2-3 天

注意事项:

一:加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

二:混匀质粒时应用手指快速bo打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌             量。

三:平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

四:4.MSU440具有an霉素抗性,不可用于具有lian霉素抗性质粒的转化。

备注:

1、农杆菌相关抗生素配方:

image.png

2、常用农杆菌抗性:(R:抗;S:敏感。)

image.png

3、TY配方(1L):

Tryptone 5gYeast extract 3g补水到1L体积,wan全溶解后,121度、20分钟高温灭菌配制1M的氯化钙水溶液,121度、20分钟高温灭菌每1L 灭菌的TY液体营养液中加入10ml 无菌的1M氯化钙水溶液即可。若配制TY固体培养基,则加入15g 琼脂粉



产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

联系我们

合肥恩派尔贸易有限公司 公司地址:安徽省合肥市高新区黄山路624号桑夏精英时代广场507室   技术支持:化工仪器网
  • 联系人:刘畅
  • QQ:3644884546
  • 公司传真:4009005473
  • 邮箱:3644884546@qq.com

扫一扫 更多精彩

公众号

小程序