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B834(DE3) 感受态细胞

简要描述:B834(DE3) 感受态细胞 保存条件:-80℃ 基因型F-ompT hsdSB(rB-mB-) galdcm met(DE3)

  • 产品型号:ABG208-50
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-03-25
  • 访  问  量:84

详细介绍

品牌Abnbio货号ABG208-50
规格50X100ul供货周期现货
主要用途感受态细胞应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型

F-ompT hsdSB(rB-mB-) galdcm met(DE3)


简要说明

B834 是 BL21 菌株的父系菌株。该系列宿主菌是蛋氨酸缺陷型,可以用来高水平,高特异性的使用35S-蛋氨酸和硒代蛋氨酸标记目的蛋白,进行蛋白质晶体结构研究。B834宿主菌也是 lon 和 ompT 蛋白酶缺陷型菌株。DE3 是溶源性的λDE3, 所以带有T7RNA 聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于 pET 系列载体,及其他T7 启动子系列载体。


操作说明

1、取 100μl 冰上融化的B834(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25 分钟。

2. 42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后 37℃,200rpm 复苏60 分钟。

4. 5000rpm 离心一分钟收菌,留取100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT 或LB培养基上。

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。


注意事项

1、感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG 浓度可选(0.1-40mM 均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。








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