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BL21-CodonPlus (DE3)-RIL 感受态细胞

简要描述:BL21-CodonPlus (DE3)-RIL 感受态细胞 保存条件:-80℃ 基因型F– ompT hsdS(rB– mB–) dcm+ galλ(DE3)endAHte[argUileY leuW Camr ]

  • 产品型号:ABG207-50
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-03-25
  • 访  问  量:89

详细介绍

品牌Abnbio货号ABG207-50
规格50X100ul供货周期现货
主要用途感受态细胞应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型

F– ompT hsdS(rB– mB–) dcm+ galλ(DE3)endAHte[argUileY leuW Camr ]


简要说明

CodonPlus(DE3)-RIL菌株来源于Stratagene公司的BL21-Gold 菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA) 对应的tRNA (argU、ileY、leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,具有lu霉素抗性。BL21- Codon Plus(DE3)-RIL 感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。


操作说明

1、取100μl冰上融化的AngYuBio BL21-CodonPlus(DE3)-RIL感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 

3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。



注意事项

1、感受态细胞最好在冰上融化。

2.混入质粒时应轻柔操作。

3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。







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