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BL21(DE3) Chemically Competent 感受态

简要描述:BL21(DE3) Chemically Competent 感受态 保存条件:-80℃ 基因型 F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)

  • 产品型号:ABG201-50
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-03-25
  • 访  问  量:36

详细介绍

品牌Abnbio货号ABG201-50
规格50X100ul供货周期现货
主要用途感受态细胞应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)


简要说明

BL21(DE3)感受态细胞用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于BL21的染色体上,所以称为BL21(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。BL21(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。


操作说明

  1. 取100μl冰上融化的 BL21(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

  2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

  3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


注意事项

  1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2.混入质粒时应轻柔操作。

3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。




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