BL21(DE3) Chemically Competent 感受态

简要描述：BL21(DE3) Chemically Competent 感受态保存条件：-80℃ 基因型 F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)

产品型号：ABG201-50
产品品牌：Abnbio
更新时间：2024-03-25
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详细介绍

品牌	Abnbio	货号	ABG201-50
规格	50X100ul	供货周期	现货
主要用途	感受态细胞	应用领域	环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)

简要说明

BL21（DE3）感受态细胞用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于BL21的染色体上，所以称为BL21(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。BL21（DE3）感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。

操作说明

取100μl冰上融化的 BL21（DE3）感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

注意事项

感受态细胞最好在冰上融化。

2.混入质粒时应轻柔操作。

3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4.诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2mM均可）。

5.为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

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