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详细介绍
| 品牌 | Abnbio | 货号 | ABG200-50 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50X100ul | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 感受态细胞 | 应用领域 | 环保,食品,化工,生物产业,制药 |
基因型E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal[malB+]K-12(λS)
简要说明BL21是最早开发的用于原核表达的菌株，BL21（DE3）、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达，不含T7RNA聚合酶，所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如：pET系列)；但含有大肠杆菌RNA聚合酶，可以用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达（如：pGEX，pMAL质粒）。 BL21感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg。
操作说明
1.取100μl冰上融化的BL21感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项
感受态细胞最好在冰上融化。
混入质粒时应轻柔操作。
转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2mM均可）。
为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
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