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BL21 Chemically Competent Cell感受态细胞

简要描述:BL21 Chemically Competent Cell感受态细胞 保存条件:-80℃ 基因型E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal[malB+]K-12(λS) BL21 Chemically Competent Cell感受态细胞

  • 产品型号:ABG200-50
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-03-25
  • 访  问  量:56

详细介绍

品牌Abnbio货号ABG200-50
规格50X100ul供货周期现货
主要用途感受态细胞应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal[malB+]K-12(λS)

简要说明BL21是最早开发的用于原核表达的菌株,BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达,不含T7RNA聚合酶,所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如:pET系列);但含有大肠杆菌RNA聚合酶,可以用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达(如:pGEX,pMAL质粒)。 BL21感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg。


 操作说明

 1.取100μl冰上融化的BL21感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 

3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


注意事项

  1. 感受态细胞最好在冰上融化。

  2. 混入质粒时应轻柔操作。

  3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

  4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

  5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。


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