双抗混合液(100X)用于预防细胞培养的细菌污染,特别是革兰氏阳性和阴性细菌的污染。产品经过滤除菌处理,可以直接添加到细胞培养液内。青霉的含量为10kU/ml,含量为10mg/ml.在细胞培养液中推荐的青霉的工作浓度为100U/ml,链霉的工作浓度为0.1mg/ml。即按照100倍稀释使用即可。
核心操作要点如下:
一、配制与保存
工作浓度:按1:100比例稀释(如5ml双抗母液+495ml培养基),终浓度青霉素100U/ml、链霉素0.1mg/ml。
保存条件:母液需-20℃避光保存,避免反复冻融(≤3次);工作液需2周内用完。
二、使用流程
实验前准备:彻底清除旧培养基,PBS润洗后加入预温的双抗培养基。
无菌操作:在超净台内完成,使用无菌移液器具,开盖后优先分装母液。
解冻与溶解:母液需2-8℃缓慢解冻,若出现结晶可37℃温育20-30分钟或轻轻摇匀,禁止剧烈震荡。
注意事项:
避免污染:操作全程需无菌,母液分装后使用,减少污染风险。
浓度控制:过高浓度易致细胞毒性,需严格按比例稀释。
特殊场景:
难抑菌污染:改用含庆大霉素或两性霉素B的三抗溶液。
无血清培养:选择无动物源成分的合成抑菌剂。
流式细胞术干扰:选用无酚红配方的双抗溶液。