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R5421 酵母感受态细胞

简要描述:R5421 酵母感受态细胞 保存条件:-80℃ 酵母促转化剂 100μl -20℃毕赤酵母转化液 5 ml 4℃

  • 产品型号:ABG709-50
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-04-23
  • 访  问  量:675

详细介绍

品牌Abnbio货号ABG709-50
规格50X100ul供货周期现货
主要用途感受态细胞应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型

MATα ura3-52 leu2 trk1Δhis3Δ200 his4-15trk2Δ1::pCK64

 

简单说明:

1、R5421酿酒酵母菌株为K+/钾离子缺陷型菌株,在文献中也称为CY162,MATα型,多用于K+/钾离子转运蛋白的鉴定试验中,也可用于K+/钾离子通道或钠钾离子泵的鉴定试验。Transformation marker为:ura3,leu2,该菌株可以在含有100mM KCl的培养基中正常生长,在含有5-10mMKCl的培养基中生长缓慢,当培养基中KCl浓度低于0.5mM,R5421(CY162)细胞停止生长。R5421感受态细胞经特殊工艺制作,pGADT7质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

 

操作说明

1、取一支无菌的1.5ml EP管,依次加入预冷的目的质粒1-3µg,Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴,重复一次),100µl冰上融化的感受态细胞,PEG/LiAc 500µl,轻轻翻转混匀6-8次; 

2. 30℃水浴30min,每10min轻轻翻转混匀6-8次;

3. 每支加入20µl的二甲基亚砜;(用于提高转化效率,可不做)4. 42℃水浴15min,每5min轻轻翻转混匀6-8次;5. 12000rpm瞬时离心弃上清,每支加入1ml的YPDPlus于30℃复苏1h;(用于提高转化效率,可不做)6. 12000rpm瞬时离心弃上清,用100µl 0.9%NaCl重悬,涂板,30℃培养48-96h。

 

注意事项

1、感受态细胞最好在冰上融化。

2. PEG溶液在低温环境下会析出,请于常温下溶解后使用。

 

 

 

 

 

 

 

 

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