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Cassification
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详细介绍
品牌 | Abnbio | 货号 | ABG723-50 |
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规格 | 50X100ul | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 感受态细胞 | 应用领域 | 环保,食品,化工,生物产业,制药 |
简要说明
1、取需转化质粒5µg,酶切,回收;
2. 取一支无菌的1.5ml EP管,依次加入预冷的线性质粒1-5µg(体积不高于15 µl),酵母促转化剂10µl,100µl冰上融化的感受态细胞,毕赤酵母转化液500µl,轻轻翻转混匀6-8次;
3. 30℃水浴30min,每15min轻轻翻转混匀6-8次;
4. 每支加入20µl的二甲基亚砜;(用于提高转化效率,也可不做)
5. 42℃水浴15min,每7.5min轻轻翻转混匀6-8次;
6. 12000rpm瞬时离心弃上清,每支加1ml的YPGPlus(或YPG)于30℃复苏1h;(用于提高转化效率,也可不做)
7. 12000rpm瞬时离心弃上清,用100µl 0.9%NaCl重悬,涂板,30℃培养3-7d。
注意事项
1、使用酵母促转化剂前,请把装有酵母促转化剂的管子在沸水中 煮沸5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃储存备用。
2.转化液低温环境下会析出,请于常温下溶解后使用。
3.转化全程要无菌操作。
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