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TB1 感受态细胞

简要描述:TB1 感受态细胞 保存条件:-80℃ 基因型F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (StrR)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15]thi hsdR

  • 产品型号:ABG217-50
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-03-27
  • 访  问  量:67

详细介绍

品牌Abnbio货号ABG217-50
规格50X100ul供货周期现货
主要用途感受态细胞应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型

F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (StrR)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15]thi hsdR


简要说明

TB1感受态细胞来源于JM83,是JM83hsdR型,只含有大肠杆菌RNA polymerase,缺少BL21(DE3)菌株的 T7 RNA polymerase,适合NEB公司的pMAL系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use the E. coliRNApolymerase),不能用于pET系列质粒的表达,具有lian霉素抗性。TB1感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。


操作说明

1、取100μl冰上融化的TB1感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 

3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


注意事项

1、感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。











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