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详细介绍
| 品牌 | Abnbio | 货号 | ABG217-50 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50X100ul | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 感受态细胞 | 应用领域 | 环保,食品,化工,生物产业,制药 |
基因型
F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (StrR)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15]thi hsdR
简要说明
TB1感受态细胞来源于JM83，是JM83hsdR型，只含有大肠杆菌RNA polymerase，缺少BL21(DE3)菌株的 T7 RNA polymerase，适合NEB公司的pMAL系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use the E. coliRNApolymerase)，不能用于pET系列质粒的表达，具有lian霉素抗性。TB1感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
操作说明
1、取100μl冰上融化的TB1感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项
1、感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2mM均可）。
5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
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