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OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞

简要描述:OrigamiB(DE3)pLysS 感受态细胞 保存条件:-80℃ 基因型F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC(DE3)gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR) pLysS CamR

  • 产品型号:ABG216-50
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-03-27
  • 访  问  量:63

详细介绍

品牌Abnbio货号ABG216-50
规格50X100ul供货周期现货
主要用途感受态细胞应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型

F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC(DE3)gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR) pLysS CamR


简要说明

Origami B (DE3) pLysS菌株携带pLysS质粒,具有lu霉素抗性。pLysS可表达T7yu菌酶(T7 yu菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌,还可与T7RNA聚合酶结合抑制其转录活性,进而降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达),适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。Origami B (DE3) pLysS菌株表达突变的硫氧还蛋白还原酶 (thioredoxin reductase) (trxB)和gu胱甘肽还原酶(glutathione reductase) (gor),这两个酶是还原途径的关键酶,突变后有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。此外,该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,具有lu霉素、ka那霉素和四环素抗性,不能用于具有lu霉素,ka那霉素抗性质粒的表达。Origami B (DE3) pLysS感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达108 cfu/μg DNA。


操作说明

1、取100μl冰上融化的Origami B (DE3) pLysS感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

 3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


注意事项

1、取100μl冰上融化的Origami B (DE3) pLysS感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 

3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。










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