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OrigamiB(DE3) 感受态细胞

简要描述:OrigamiB(DE3) 感受态细胞 保存条件:-80℃ 基因型F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC
(DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR)

  • 产品型号:ABG215-50
  • 产品品牌:Abnbio
  • 更新时间:2024-03-27
  • 访  问  量:134

详细介绍

品牌Abnbio货号ABG215-50
规格50X100ul供货周期现货
主要用途感受态细胞应用领域环保,食品,化工,生物产业,制药

基因型

F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC(DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR)


简要说明

OrigamiB(DE3)感受态细胞包含突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)(trxB)和gu胱甘肽还原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,具有ka那霉素和四环素抗性,不能用于具有ka那霉素抗性质粒的表达。OrigamiB(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达


操作说明

1、取100μl冰上融化的OrigamiB(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

 3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌2YT或LB培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


注意事项

1、感受态细胞最好在冰上融化。

2.混入质粒时应轻柔操作。

3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

 6.具有ka那霉素抗性,不能用于具有ka那霉素抗性质粒的表达。









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