DMEM(Dulbecco改良Eagle培养基)是一种广泛使用的基础培养基,可用于支持很多种类的哺乳动物细胞生长。已经在DMEM中培养成功的细胞包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞,以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等细胞系。针对广泛的细胞培养应用,提供了多种组分的DMEM改良培养基。使用培养基选择工具查找适合的配方。
低糖培养基的适用场景:
细胞类型:原代肿瘤细胞、贴壁依赖性强的上皮细胞、单克隆抗体融合实验。
研究领域:糖代谢机制、糖尿病模型构建、疫苗生产。
判断细胞适应低糖环境的核心指标:
代谢活性变化:
糖酵解抑制:低糖环境下,若细胞通过增强磷酸戊糖途径或谷氨酰胺代谢维持能量供应,表明其适应能力较强。
乳酸积累减少:低糖培养基中乳酸产量降低40%以上,提示细胞代谢转向更高效途径。
增殖与周期调控:
生长速率:适应低糖的细胞在低糖酸性条件下S期比例恢复,接近正常培养水平。
周期阻滞缓解:通过流式细胞术检测,若G2期细胞比例下降且增殖标志物表达稳定,说明细胞已适应。
分子标志物检测:
c-Myc通路激活:c-Myc及其下游基因(ASCT2、GLS、PPAT)表达上调,驱动谷氨酰胺代谢和核苷酸合成。
凋亡抑制:BAK/BAX蛋白活性降低,细胞凋亡信号减弱(如癌细胞通过此机制逃逸化疗杀伤)。